确定下面序列中的3'拼接位点。 5'-ACGUACUAACAUUCUAUUCCVVAAGUUCAUAAGUUGAGUC-3' 如果3'
确定下面序列中的3'拼接位点。
5'-ACGUACUAACAUUCUAUUCCVVAAGUUCAUAAGUUGAGUC-3'
如果3'拼接位点的一致序列发生了突变,那么邻近的隐蔽的3'拼接位点就会被激活,这个隐蔽的3'拼接位点在哪里?这对pre-mRNA编码的蛋白质会有怎样的后果?
确定下面序列中的3'拼接位点。
5'-ACGUACUAACAUUCUAUUCCVVAAGUUCAUAAGUUGAGUC-3'
如果3'拼接位点的一致序列发生了突变,那么邻近的隐蔽的3'拼接位点就会被激活,这个隐蔽的3'拼接位点在哪里?这对pre-mRNA编码的蛋白质会有怎样的后果?
第1题
下列关于RNA拼接位点的陈述哪些是正确的?
A.拼接位点包含长的一致序列。
B.5'拼接位点和3'拼接位点互补。
C.几乎所有的拼接位点遵循GT—AG规律。
D.在成熟mRNA中仍保留着拼接位点。
E.一个内含子的5'和3'拼接位点可能相距很远。
F.同一个内含子的5'拼接位点只和3'拼接位点相互作用,杂交的内含子不被剪接。
第2题
A.通过两步转酯反应从tRNA中移去。
B.有一段与反密码子互补的序列。
C.形成一种同样的二级结构。
D.被蛋白质酶(内切核酸酶和连接酶)移去。
E.在3'和5'拼接位点有一致序列。
第3题
A.外来的G与内元的5'-末端共价结合。
B.GIP被水解。
C.内元形成套索结构。
D.第一步中,G结合部位被外源G占据,而在第二步中则被3'拼接位点的G占据。
E.切下来的内元进行附加反应,其中包括两次环化反应。
第4题
A.以一种与“组成型”拼接完全不同的方式拼接。
B.产生单个基因的多个同种型蛋白质(是不同于那些增加或减少几个氨基酸的产物的突变体)。
C.包括对3'和5'拼接位点的利用。
D.经常在不同的发育阶段或不同的组织中产生不同的蛋白质。
E.可能越过某些外显子,使用替代的外显子,或者保留某些内含子。
第5题
果蝇中,tra基因pre-mRNA的替换拼接涉及到对两个竞争的3'拼接位点的选择,这个雌性特异性(FS)3'拼接位点在基因终止密码子的下游,而非性别特异性(NSS,在雌性和雄性中都使用)拼接位点在终止密码子的上游,这两个拼接位点前面都有一个多聚嘧啶区域(Py-Fs和Py-NSS,见图解)。
当UZAF结合到Py-Fs或Py-NSS上时3'拼接位点就被选择。UZAF在所有细胞中都存在,而Sxl(性致死蛋白)仅存在于雌性中。Sxl是一种RNA结合的蛋白,同UZAF一样,结合于富含嘧啶的RNA上。Valearcel et. al(Nature 362,171-175,1993)测出了Sxl、UZAF蛋白质与Py-FS、Py-NSS的结合能力,其结果概括如下表:
UZAF Sxl
Py-NSS strong very strong
Py-FS moderate none
对于这些结果,请设计一种特殊的模型,这种模型能够解释Sxl蛋白质导致tra基因pre-mRNA的雌性特异性拼接。
第6题
RNA噬菌体R17的外壳蛋白的起始位点周围的核苷酸序列如下:
5'-…G A A G C A U G G C U U C U A A C U U U…-3'
第7题
A.限制性酶1和酶3剪出的黏性末端相同
B.不同的限制酶有不同的识别序列和切割位点,体现了酶的专一性
C.能够识别和切割RNA分子内一小段核苷酸序列的酶只有限制酶2
D.限制酶2和3识别的序列都包含6个碱基对
第9题
人类基因组DNA经过Sau3A(G↓ATC)部分酶切后,连接到载体pCU999的BamHⅠ位点上 (G↓GATCC)。BamHⅠ位于多克隆位点的SalⅠ和NotⅠ之间,二者距离20 bp。 (1)从文库中分离出某克隆(克隆1),分别用NotⅠ(N)、SalⅠ(S)或SalⅠ十NotⅠ(S十N)酶切后,电泳分离并用EB染色。DNA转移到膜上后,用载体上的DNA作为探针进行杂交,结果如下图所示:
假设同源序列50 bp以下则无杂交信号。在此基因组DNA上标上所有的SalⅠ和NotⅠ位点,标明酶切位点间距离。 (2)从同样的文库中分离到带有重叠片段的克隆(克隆2),用同样的酶切、电泳、转膜后,以克隆1的DNA为探针(包括基因组DNA和载体DNA)进行southern杂交,结果如下图所示:
画出克隆2的图,标明所有SalⅠ和NotⅠ位点及位点间距离。 (3)所有的人类基因组DNA都用SalⅠ酶切,并用来自于克隆1或克隆2的DNA为探针作Southern杂交,结果如下图所示:
其中6个SalⅠ切点的位置可以用以上的结果来确定。请画出这一区域的SalⅠ位点图。