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[主观题]

你纯化出经BamHI消化重组质粒DNA所得的两个DNA片段,其中一个长为400bp,另一个长900bp,你想要如图16-3-20(1)

你纯化出经BamHI消化重组质粒DNA所得的两个DNA片段,其中一个长为400bp,另一个长900bp,你想要如图16-3-20(1)所示将它们连接起来产生一个杂合基因,如果你的推测是正确的话,就会得到令人惊奇的新物质。

你纯化出经BamHI消化重组质粒DNA所得的两个DNA片段,其中一个长为400bp,另一个长900b

你在DNA连接酶存在情况下将两种片段混合在一起并且进行孵育,30分钟后和8小时后,你取一些样品进行琼脂糖凝胶电泳分析,你惊讶地发现连接得到了一系列复杂的DNA片段而不是所需的1.3kb小片段,并且发现孵育时间越长,小片段浓度越低而大片段浓度增加,如果你用BamHI切割连接后的重组体,你会重新获得开始的两片段(图16-3-20(2)A)。

你纯化出经BamHI消化重组质粒DNA所得的两个DNA片段,其中一个长为400bp,另一个长900b

令人吃惊的是,你将从琼脂糖凝胶中纯化得到的1.3kb片段用BamHI消化,检查它的结构,与预想的一样,可以得到最初的两片段(图16-3-20(2)B)。这就可以确定这是你所需的结构。但是,你用EcoRl消化另一份样品,你希望通过消化得到300bp的片段和700bp的片段,但你跑的电泳是一系列DNA片段(图16-3-20(2)B)。

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更多“你纯化出经BamHI消化重组质粒DNA所得的两个DNA片段,其中一个长为400bp,另一个长900bp,你想要如图16-3-20(1)”相关的问题

第1题

质粒pHUBI DNA是双链环状,长5.7kb(5.7×103个碱基对)。这个质粒带有某基因,它的蛋白质产物使宿主细菌对四环素

质粒pHUBI DNA是双链环状,长5.7kb(5.7×103个碱基对)。这个质粒带有某基因,它的蛋白质产物使宿主细菌对四环素具有抗性(Tet-r)。该DNA对下列每种限制酶具有一个识别位点:EcoRI、HpaI、BamHI、PstI、SalI、BglII。在BarnHI和SalI位点处克隆会破环四环素抗性;在其他酶的位点处克隆则保留四环素抗性。用各种限制酶以及酶混合物消化可得到如表16-2-11所列的DNA片段。试在pHUBIDNA图上标出所有这些酶的切点。将DNA图画成环形,在圆周上以5.7kb总长标出刻度。

表16-2-11

酶混合物片段长度(kb)
EcoRI

EcoRI,BamHI

EcoRI,HpaI

EcoRI,SalI

EcoRI,BglII

EcoRI,PstI

PstI,BglII

BglII,HpaI

5.7

0.4,5.3

0.5,5.2

0.7,5.0

1.1,4.6

2.4,3.3

1.3,4.4

0.6,5.1

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第2题

用BamH Ⅰ切割一重组质粒DNA分子并从中分离纯化了两个DNA片段,一段长400bp,另一段长900bp。现在希望将这两个

片段重新连接起来,得到如图Q25.1所示的结果。

用BamH Ⅰ切割一重组质粒DNA分子并从中分离纯化了两个DNA片段,一段长400bp,另一段长90图025.1杂合基因的结构

于是将这两种片段混合起来,并在连接酶的存在下进行温育,分别在30min和8h取样进行凝胶电泳分析。令人惊讶的是,连接产物并非是理想中的1.3kb的重组分子,而是一种复杂的片段模式[图Q25.2(a)]。同时发现随着温育时间的延长,较小片段的浓度逐渐降低,大片段的浓度逐渐增加。如果用BamH Ⅰ来切割连接后的混合物,则起始的片段可以重新产生[图Q25.2(a)]。

从凝胶中分离纯化出1.3kb的片段,并取出一部分用BamH Ⅰ进行切割,以检查它的结构。正如预料的一样,出现了两个原始的带[图Q25.2(b)]。但是用EcoR Ⅰ切割另一部分样品,希望能够产生两个300bp和一个长度为700bp的核苷酸片段,然而,凝胶电泳的结果,令人惊奇[图Q25.2(b)]。

用BamH Ⅰ切割一重组质粒DNA分子并从中分离纯化了两个DNA片段,一段长400bp,另一段长90图Q25.2纯化DNA片段连接后电泳检测

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第3题

你从朋友处得到一个重组的质粒DNA,该质粒含有一个在果蝇神经细胞中表达的基因,根据初步实验,你推测表达产物
与信号转导有关。如何证实你的推测?
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第4题

一般经体外酶切连接操作后的载体DNA或重组DNA其转化率低于具有超螺旋结构的质粒是由于其()发生改变。
一般经体外酶切连接操作后的载体DNA或重组DNA其转化率低于具有超螺旋结构的质粒是由于其()发生改变。

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第5题

关于重组DNA技术的叙述,错误的是()。A.质粒、噬菌体可作为载体B.限制性内切酶是主要工具酶之一C

关于重组DNA技术的叙述,错误的是()。

A.质粒、噬菌体可作为载体

B.限制性内切酶是主要工具酶之一

C.重组DNA由载体DNA和目标DNA组成

D.重组DNA分子经转化或转染可进入宿主细胞

E.进入细胞内的重组DNA均可表达目标蛋白

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第6题

外源DNA导入宿主细胞的方法中,不是依据转化方式原理而进行的方法是()。A.重组质粒载体+感受态

外源DNA导入宿主细胞的方法中,不是依据转化方式原理而进行的方法是()。

A.重组质粒载体+感受态细胞

B.重组噬菌体DNA或重组噬菌质粒+感受态细胞

C.外源DNA被包装成A噬菌体颗粒+宿主细胞

D.酵母质粒载体+酵母细胞的原生质体

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第7题

关于基因工程的叙述,错误的是( )

A.也称重组DNA技术

B.属于生物技术工程

C.需要目的基因

D.只有质粒DNA能被用作载体

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第8题

从转化菌中筛选DNA重组体的常用方法不包括()。

A.杂交筛选

B.质粒的小量快速提取

C.DNA序列测定

D.插入失活

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第9题

考斯质粒(cosmid)是一种()

A.天然质粒载体

B.由λ-DNA的cos区与一质粒重组而成的载体

C.具有溶原性质的载体

D.能在受体细胞内复制并包装的载体

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第10题

Gordon会议提出的建议有()。

A.暂时禁止两类实验的进行:一是关于制造新的、能自我复制的有潜在危险的质粒实验;二是将癌基因或其他动物病毒基因与质粒或其他病毒基因进行连接的实验。

B.对将动物DNA和质粒或噬菌体DNA相连的实验要慎重考虑。

C.呼吁美国卫生研究院建立一个顾问委员会,负责重组DNA的风险评价,建立准则来指导重组DNA研究。

D.在1975年召开一次国际会议,科学家共同讨论如何对待重组DNA分子可能带来的危害。

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