用基因工程技术制备一种质粒,其含有的一个基因是编码某基因产物的mRNA拷贝。该质粒DNA分离、变性,并与该基因
第1题
A.常用相同限制酶处理目的基因和质粒
B.NA 连接酶和 RNA 聚合酶是构建重组质粒必需的工具酶
C.可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒
D.导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达
第2题
A.单克隆抗体制备过程中,在完成细胞融合后,第一次筛选的目的是筛选出杂交瘤细胞
B.单克隆抗体制备过程中,在完成细胞融合后,第二次筛选的目的是筛选出针对目标抗原的抗体为阳性的杂交瘤细胞
C.基因工程中用不同种限制酶切割载体和含目的基因的DNA片段,酶切产物用DNA连接酶连接,获得的产物可直接导入受体细胞,不需要筛选
D.重组质粒上的标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来
第3题
有-8.8kb含四环素抗性基因的重组质粒,要将其转入大肠埃希氏菌DH5α(对四环素没有抗性)中,用什么方法可以实现这一过程,写出实验步骤
第4题
有人建议用PCR扩增同该蛋白质结合的微量DNA,思路是(图Q25.8):①合成一组长为26个碱基的随机序列的寡聚核苷酸混合体,在该序列的两侧各有一段25个碱基的序列作为PCR扩增的引物位点[图Q25.8(a)];②把这些寡聚核苷酸加到含有转录因子的细胞粗提取物中,转录因子可以同含有结合位点的寡聚核苷酸结合;③用转录因子特异的抗体分离同转录因子结合的寡聚核苷酸;④用PCR扩增选择到的寡聚核苷酸进行序列分析。
图Q25.8 用随机的寡聚核苷酸选择和扩增特异的DNA序列(a)用于选择的原初随机序列的寡聚核苷酸,N代表任何一种核苷酸;EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ位点有利于选择DNA的克隆和序列分析。(b)同序列特异的DNA结合蛋白结合的寡聚核苷酸的选择和序列分析方案按照这一思路,用0.2ng单链随机序列的寡聚核苷酸开始了这项实验,这个寡聚核苷酸可以同一个PCR引物结合成部分双链,经过如图Q25.8(b)所示的四轮选择和复制后,用BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ消化分离到的DNA,将片段克隆到质粒中,并测定了10个独立的克隆(表Q25.1),问:
表Q25.1 10个克隆的序列
注:画线的序列是PCR引物部位,两种序列都是从BamH Ⅰ末端开始,所有序列中结合位点的方向都是相同的。
第5题
二氢叶酸还原酶缺陷型(dfr-)仓鼠细胞株用质粒转化,该质粒含dfr-结构基因,并与激素诱导基因的启动基因以及另一个在本系统是显性选择标记的基因xgp相连。转化细胞根据合成Xgp的能力进行选择。所有这些挑选的细胞也都能合成Dfr。用剂量递增的氨甲蝶呤处理细胞。选择出一株细胞,比出发的转化细胞对氨甲蝶呤的抗性高200倍,同时Dfr酶含量也高200倍。
第6题
A.切割质粒的限制性核酸内切酶均特异性地识别6个核苷酸序列
B.PCR反应中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应
C.载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因
D.抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达
第7题
A.细菌经过了转化作用
B.基因没有粘性末端
C.该基因含有内含子
D.该基因不是来自基因组文库
第8题
A.一种酶
B.用于检测疾病的医疗器械
C.一种抗体
D.用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子
第9题
A.含有人胰岛素基因的大肠杆菌生产胰岛素
B.将人肝癌组织中的癌细胞培养成一个无限细胞系
C.通过体外受精和胚胎移植诞生试管婴儿
D.通过体细胞克隆技术培养出克隆羊
第10题
假定有一细菌的某种基因含1000个碱基对。用一种诱变剂处理细菌培养物,该基因中的突变以每105个细胞一个突变体的频率回复。取其中的一个突变体,进行培养,并得到这一突变体的纯培养物。然后用同一诱变剂处理,并在每5~10个细胞中找到一个回复子。从回复子中获得的基因产物是否会具有同野生型细胞一样的氨基酸顺序?试作解释。