下列与DNA重组连接相关的说法正确的是()
A.不匹配的粘末端可通过部分填补后连接。
B.同聚尾法连接不仅连接效率高,也易回收插入的片段。
C.限制酶切割DNA后加入EDTA-SDS终止液抑制限制酶活性,将有利于重组连接。
D.Mg2+-ATP是T4DNA连接酶反应时的必须因素。
E.平末端连接时,在反应体系中加入适量凝聚剂可提高连接效率。
A.不匹配的粘末端可通过部分填补后连接。
B.同聚尾法连接不仅连接效率高,也易回收插入的片段。
C.限制酶切割DNA后加入EDTA-SDS终止液抑制限制酶活性,将有利于重组连接。
D.Mg2+-ATP是T4DNA连接酶反应时的必须因素。
E.平末端连接时,在反应体系中加入适量凝聚剂可提高连接效率。
第2题
A.基因载体的选择与构建
B.目的基因与载体的连接
C.重组DNA分子导入受体细胞
D.筛选并克隆含重组体的受体细胞
E.表达目的基因编码的蛋白质
第3题
A.目的基因获取
B.表达目的基因编码的蛋白质
C.外源基因与载体的连接
D.重组DNA分子导入受体细胞
E.筛选并无性繁殖含重组DNA分子的受体细胞
第4题
第5题
A.沙门氏菌会通过位点特异性重组、自发改变其鞭毛蛋白
B.λ噬菌体的整合酶属于Ⅱ型拓扑异构酶
C.λ噬菌体DNA整合到宿主DNA中的过程需要整合酶
D.IgG基因的重排与位点特异性重组有关
第7题
A.暂时禁止两类实验的进行:一是关于制造新的、能自我复制的有潜在危险的质粒实验;二是将癌基因或其他动物病毒基因与质粒或其他病毒基因进行连接的实验。
B.对将动物DNA和质粒或噬菌体DNA相连的实验要慎重考虑。
C.呼吁美国卫生研究院建立一个顾问委员会,负责重组DNA的风险评价,建立准则来指导重组DNA研究。
D.在1975年召开一次国际会议,科学家共同讨论如何对待重组DNA分子可能带来的危害。
第8题
你纯化出经BamHI消化重组质粒DNA所得的两个DNA片段,其中一个长为400bp,另一个长900bp,你想要如图16-3-20(1)所示将它们连接起来产生一个杂合基因,如果你的推测是正确的话,就会得到令人惊奇的新物质。
你在DNA连接酶存在情况下将两种片段混合在一起并且进行孵育,30分钟后和8小时后,你取一些样品进行琼脂糖凝胶电泳分析,你惊讶地发现连接得到了一系列复杂的DNA片段而不是所需的1.3kb小片段,并且发现孵育时间越长,小片段浓度越低而大片段浓度增加,如果你用BamHI切割连接后的重组体,你会重新获得开始的两片段(图16-3-20(2)A)。
令人吃惊的是,你将从琼脂糖凝胶中纯化得到的1.3kb片段用BamHI消化,检查它的结构,与预想的一样,可以得到最初的两片段(图16-3-20(2)B)。这就可以确定这是你所需的结构。但是,你用EcoRl消化另一份样品,你希望通过消化得到300bp的片段和700bp的片段,但你跑的电泳是一系列DNA片段(图16-3-20(2)B)。
第10题
A.引入某些限制酶切位点。
B.人工构建载体。
C.增加调控元件。
D.调整阅读框。
E.通过接头引入与目的基因相同的限制酶位点,并对目的基因相应酶切点进行甲基化修饰保护,可保护目的基因不受限制酶破坏。