第1题
用EcoRI酶解具有单个EcoRI位点的Tet-r质粒。将样品退火,用DNA连接酶处理,然后进行CaCl2转化实验。挑选Tet-r菌落。从这些菌落中分离出质粒DNA,进行凝胶电泳,结果发现有两类菌落:一类菌落在原来质粒的预期位置处出现一条带;另一类菌落则得到一条移动慢得多的带。这条移动慢的带可能是何物?(用BglI酶处理Kan-rAmp-r质粒会破坏amp基因)
第2题
A.用两种限制酶分别切割运载体和人类胰岛素基因
B.用适当的化学物质处理受体细菌表面,将重组DNA导入受体细菌
C.通过受体表现出来的外在性状来检测重组DNA是否已导入受体细胞
D.重组DNA必须能在受体细菌内进行复制与转录,并合成人类胰岛素
第3题
噬菌体中DNA分子具有短的互补的单链末端,当它感染细菌时该分子环化。图16-3-7的A和B分别显示用Bam限制酶处理游离的DNA分子后得到的限制酶图谱和凝胶电泳条带。从受感染的细胞中分离出DNA进行特性研究。在某些条件下酶解后的片段经电泳后结果如图16-3-7C所示。试问在这些条件下DNA呈怎样的结构?
第4题
A.4个
B.3个
C.2个
D.至少2个
第5题
四膜虫(Tetrahymena)是一种有两个胞核的有纤毛原生动物,小胞核(micronucleus)具有细胞染色体的主拷贝,其参与有性接合,但不参与日常基因的表达。大胞核(macronucleus)是一种由很多大小基因双链DNA片段形成的细胞基因组的“工作”拷贝(小染色体-minichromosomes),其参与基因转录,小染色体的许多拷贝中都有核糖体RNA的基因。可用梯度离心将其与其他小染色体分离,以进行进一步的研究。
通过电镜检测发现每个含核糖体基因小染色体为线性结构,长21kb。用琼脂糖凝胶电泳观察其仍为21kb(图16-3-24,泳道1)。如果用限制酶BglⅡ酶切小染色体,产生的两个片段13.4和3.8kb加起来不到21kb(图16-3-24,泳道2)。用其他限制酶酶切DNA,所得片段大小加起来仍旧不足21kb,而且每一种消化所产生的片段大小之和均不同。
如果未切割的小染色体在跑电泳之前先经过变性退火,那么21kb片段将被切割成正好是其一半的10.5kb。用双链片段代替(图16-3-24,泳道3),相似地,如果BglⅡ切割过的小染色体经变性和退火,则13.4kb片段将被其一半大小的6.7kb双链片段代替(图16-3-24,泳道4)。
请解释为什么限制酶切割下的片段加起来不是21kb?为什么经变性退火后其电泳形式就发生改变?你认为核糖体小染色体的序列是什么样的?
第6题
A.必须分离纯化出个体染色体。
B.DNA必须仅从单倍体细胞(基因组)分离,这可避免由于二倍体细胞中同源染色体的存在而引起的模糊信息。
C.必须进行单个染色体分析,这样的分析仅在细胞分裂后期才有可能进行。
D.必须发现一些在染色体上仅有一个切割位点的限制酶。
E.必须先分离核DNA和细胞器DNA,然后用它们来分析个体的图谱。
第7题
对两个单倍体的面包酵母菌株进行比较,菌株1(交配型α)来自北美,菌株2(交配型a)来自欧洲。用单一的限制性内切酶将DNA线性化后,在凝胶电泳上将DNA分开。菌株1的样品出现两条带,一条很大,另一条很小;菌株2的样品产生两条中等大小的条带。如果运用标准的二倍体出芽方法分析,在二倍体细胞以及细胞所产生的四分子中会得到什么结果(酶切片段是什么样的)?
第8题
用HindⅢ限制酶处理某DNA大分子,得到一个DNA片段。该酶作用于如图2-3-50A中箭头所示的特定碱基顺序。为测定每条链的顺序,将5'-末端用32P标记(通过多核苷酸激酶催化的反应),再用Maxam-Gilbert序列法测定。切得片段的混合物经电泳后可得到如图2-3-50B所示的图谱(图中迁移方向为自上而下,片段越小移动距离越远)。仔细观察一下电泳图谱,回答下列问题:
第9题
A.一般情况下,用同一种限制酶切割质粒和含有目的基因的片段,但有时可用两种限制酶分别切割质粒和目的基因,这样可避免质粒和质粒之间、目的基因和目的基因之间的连接
B.标记基因的作用:筛选、检测目的基因是否导入受体细胞,常见的标记基因有抗生素抗性基因、发光基因(表达产物为带颜色的物质)等
C.在基因表达载体中,启动子(DNA片段)转录出起始密码子(RNA);终止子(DNA片段)转录出终止密码子(RNA)
D.用CaCl2处理大肠杆菌使之转变为感受态,细胞透性加大有利于DNA透过大肠杆菌