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[主观题]

用EcoRI酶解具有单个EcoRI位点的Tet-r质粒。将样品退火,用DNA连接酶处理,然后进行CaCl2转化实验。挑选Tet-r菌

用EcoRI酶解具有单个EcoRI位点的Tet-r质粒。将样品退火,用DNA连接酶处理,然后进行CaCl2转化实验。挑选Tet-r菌落。从这些菌落中分离出质粒DNA,进行凝胶电泳,结果发现有两类菌落:一类菌落在原来质粒的预期位置处出现一条带;另一类菌落则得到一条移动慢得多的带。这条移动慢的带可能是何物?(用BglI酶处理Kan-rAmp-r质粒会破坏amp基因)

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更多“用EcoRI酶解具有单个EcoRI位点的Tet-r质粒。将样品退火,用DNA连接酶处理,然后进行CaCl2转化实验。挑选Tet-r菌”相关的问题

第1题

质粒pHUBI DNA是双链环状,长5.7kb(5.7×103个碱基对)。这个质粒带有某基因,它的蛋白质产物使宿主细菌对四环素

质粒pHUBI DNA是双链环状,长5.7kb(5.7×103个碱基对)。这个质粒带有某基因,它的蛋白质产物使宿主细菌对四环素具有抗性(Tet-r)。该DNA对下列每种限制酶具有一个识别位点:EcoRI、HpaI、BamHI、PstI、SalI、BglII。在BarnHI和SalI位点处克隆会破环四环素抗性;在其他酶的位点处克隆则保留四环素抗性。用各种限制酶以及酶混合物消化可得到如表16-2-11所列的DNA片段。试在pHUBIDNA图上标出所有这些酶的切点。将DNA图画成环形,在圆周上以5.7kb总长标出刻度。

表16-2-11

酶混合物片段长度(kb)
EcoRI

EcoRI,BamHI

EcoRI,HpaI

EcoRI,SalI

EcoRI,BglII

EcoRI,PstI

PstI,BglII

BglII,HpaI

5.7

0.4,5.3

0.5,5.2

0.7,5.0

1.1,4.6

2.4,3.3

1.3,4.4

0.6,5.1

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第2题

用EcoRI酶消化T7DNA,所有片段都能环化吗?

用EcoRI酶消化T7DNA,所有片段都能环化吗?

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第3题

如果用EcoRI酶切DNA时出现星活性,试分析原因?

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第4题

怎样将一个平末端DNA片段插入到EcoRI限制位点中去?

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第5题

某研究者打算研究两个袋鼠基因A和B在大肠杆菌中的表达。在对基因A进行的实验中,用EcoRI部分酶解袋鼠DNA,将片
段插入质粒pBR322,转化到A基因缺失的大肠杆菌突变体中,并找一种需要A基因活性的选择标记。对基因B的实验是,用反转录酶合成袋鼠肝细胞mRNA,已知肝细胞含有可合成大量酶B的DNA拷贝。然后将这些DNA拷贝插入pBR322,转化到不能合成有功能B酶的大肠杆菌突变体中,将B活性作为选择标记。
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第6题

图13-3-5所示的是一段基因组DNA的限制酶图谱以及与其对应的cDNA限制酶谱图。这段基因组DNA中有多少个内含子?

图13-3-5所示的是一段基因组DNA的限制酶图谱以及与其对应的cDNA限制酶谱图。这段基因组DNA中有多少个内含子?它们在哪里?

限制酶简写:B:BamHI;C:ClaI;H:HindⅢ;R:EcoRI;S:SalI;AAA:poly(A)尾。

图13-3-5所示的是一段基因组DNA的限制酶图谱以及与其对应的cDNA限制酶谱图。这段基因组DNA

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第7题

HindIII的同裂酶是()。

A.BamHI

B.XhoI

C.EcoRI

D.HsuI

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第8题

能产生平末端的限制性内切酶是()。

A.EcoRI

B.BamHI

C.HindIII

D.AluI

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第9题

有蛋白水解酶活性的是()。

A.RecA

B.ECoRI

C.RuvC

D.LexA

E.Ffactor

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第10题

判断对错。 A.一般来说,水溶液中Ala更易于在内部。 B.Ser倾向于在内部。 C.由于其具有羟基,Ser易于处在酶的

判断对错。

A.一般来说,水溶液中Ala更易于在内部。

B.Ser倾向于在内部。

C.由于其具有羟基,Ser易于处在酶的活性位点上。

D.在0.3mol/LNaCl溶液中较之在蒸馏水中多聚Ala更伸展。

E.在0.3mol/LNaCl溶液中较之在蒸馏水中多聚Glu更伸展。

F.与肽链相邻处有自由旋转。

G.所有天然界存在的蛋白质至少含有每种氨基酸的一个残基。

H.单个氨基酸变化一定会导致蛋白质结构显著的变化。

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