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[主观题]

mRNA往往是用各种杂交技术检测的,也就是通过mRNA与单链DNA一起保温,形成DNA-RNA杂交物。有一种技术,把单链DN

mRNA往往是用各种杂交技术检测的,也就是通过mRNA与单链DNA一起保温,形成DNA-RNA杂交物。有一种技术,把单链DNA吸附在硝酸纤维素滤膜上,加上放射性标记的RNA,然后在导致杂交作用的条件下将混合物保温。游离RNA并不结合到滤膜上,所以滤膜洗涤后所结合的放射性量就是被杂交的RNA量。在某实验中,从感染噬菌体1分钟的细胞中分离出放射性mRNA,然后与分别吸咐在滤膜上的三种不同的DNA分子杂交。DNA分子如图9-3-10所示,其中的数字表示离DNA左侧的距离,相对距离范围为0~100。用野生型噬菌体(Ⅰ)感染细菌。在噬菌体DNA分子Ⅱ和Ⅲ中的阴影区代表噬菌体携带的细菌DNA。接着在两张滤膜上对各类DNA进行杂交试验,吸附有每一类DNA的一张滤膜与核酸酶一起保温(RNase,该酶酶解单链RNA但不酶解杂交的RNA);另一张滤膜不用酶处理(-RNase)。得到的数据如表9-3-10所示。试问mRNA从野生型DNA中的哪个区域转录?

mRNA往往是用各种杂交技术检测的,也就是通过mRNA与单链DNA一起保温,形成DNA-RNA杂交物

表9-3-10

滤膜上的DNA滤膜上的cpm
-RNase+RNase

1250

1260

1240

1245

418

820

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更多“mRNA往往是用各种杂交技术检测的,也就是通过mRNA与单链DNA一起保温,形成DNA-RNA杂交物。有一种技术,把单链DN”相关的问题

第1题

在构建cDNA克隆之前,可以用______来富集一特殊的核苷酸序列。做法是:用来自于能够产生目的蛋白的细胞mRNA分
子同来自于另一类型细胞(不产生这种蛋白质,但亲缘关系密切)的过量mRNA分子杂交。
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第2题

用基因工程技术制备一种质粒,其含有的一个基因是编码某基因产物的mRNA拷贝。该质粒DNA分离、变性,并与该基因
的初级转录物杂交。得到如下电镜图(细线和粗线分别表示单链和双链核酸)。试问在这个基因中有多少内含子?

用基因工程技术制备一种质粒,其含有的一个基因是编码某基因产物的mRNA拷贝。该质粒DNA分离、变性,

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第3题

现已确定果蝇X染色体中一段DNA的限制酶图谱。成年果蝇的mRNA被分离出来,用电泳分开后,转移到硝酸
纤维素膜上。DNA片段A到G被用作探针,与膜进行杂交,结果如图所示:

现已确定果蝇X染色体中一段DNA的限制酶图谱。成年果蝇的mRNA被分离出来,用电泳分开后,转移到硝酸指出参与转录的DNA片段以及该片段参与哪个mRNA的转录。内含子、外显子的分布与酶切片段之间有什么联系?

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第4题

下列有关基因工程的叙述,错误的是()

A.从基因文库中获取的某种生物的部分基因,可以实现物种间的基因交流

B.从cDNA文库中获取的目的基因,既无启动子,又无终止子

C.用人胰高血糖素基因制成的DNA探针,检测人胰岛B细胞中的mRNA,可形成杂交分子

D.基因表达载体中的标记基因,不能含有构建表达载体所用的限制酶的切割位点

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第5题

在某真核细胞中分离到大量mRNA。要了解每个细胞中究竟有多少份相应基因的拷贝。为此,通过对细胞总DNA的变性和
复性,得到Cot曲线。在复性不同阶段提取DNA样品,用DNA-RNA杂交测定该基因是否已复性,并用这种方式测得该基因在Cot曲线上的位置。根据大量存在的mRNA,能否预测该DNA在Cot曲线上的位置?试作解释。
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第6题

果蝇中P因子的转座酶由4个外显子(0,1,2,3)编码。此基因在生殖细胞中的转录产物长度为2.1 kb,包含

果蝇中P因子的转座酶由4个外显子(0,1,2,3)编码。此基因在生殖细胞中的转录产物长度为2.1 kb,包含所有这4个外显子,并编码具有转座酶活性的蛋白质。体细胞中P因子的转录产物长度为2.5 kb,除了含有全部的4个外显子之外,位于外显子2和3之间的内含子也被保留下来。 (1)体细胞中产生的较长的mRNA编码的蛋白质的大小只相当于在生殖细胞中产生的较短的转录产物编码的蛋白质的75%。较长的转录产物为什么会编码较小的蛋白质产物? (2)反转录酶能够用来从mRNA合成得到相应的双链DNA,这个DNA拷贝称为cDNA。如何利用cDNA和转基因技术得到在体细胞中也有转座酶活性的果蝇? (3)假设用限制酶SaZ工消化P因子后得到8个片段。用来自果蝇生殖细胞的转座酶的cDNA作为探针对它们进行Southern杂交,结果发现所有的8个限制酶切片段都显示阳性条带。上述结果说明了什么?

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第7题

c-fos基因是FBJ鼠骨肉瘤病毒所携带的癌基因的细胞内同源基因。它的功能未知,c-fos的激活是对于生长因子的最
早的转录反应之一。在小鼠细胞中,c-fos的转录水平在5min内显著增加,在10~15min时达最大值之后突然下降。为了研究人类c-fos基因的瞬时诱导的机制,可以克隆一个DNA片段,它含有全长的转录单元,这个转录单元起始于转录起始点上游-750bp处,终止于+1.5kb的poly(A)加入位点(图13-3-60(1)A)。当把这个克隆转至小鼠细胞中时(我们可以较为容易区分克隆与内源性c-fos基因的mRNA),一天后加入血清(富含生长因子)刺激细胞生长。你发现同样的瞬时诱导(图13-3-60(2)A)。尽管与小鼠基因相比,时间上有略微的延长。

通过分析一个类似增强子元件(SRE血清反应元件)的一系列缺失突变体,发现在转录起始点上游的300核苷酸序列对于在加入血清后增强转录是必需的。通过建立包含有人β-球蛋白部分基因(它编码一个极为稳定的mRNA)的各种杂交基因来研究c-fos mRNA的稳定性。球蛋白基因的结构和两种杂交基因如图13-3-60(1)B、C、D所示。在低血清浓度下,当杂交基因转染鼠细胞时,24小时后它才对血清作出反应(图13-3-60(2)B、C所示)。

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第8题

用肝细胞中克隆的cDNA探针可检测某mRNA分子,但脑细胞中的探针则不行。
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第9题

以下哪种检测技术不属于DNA诊断()。

A.RFLP分析

B.PCR

C.ASO杂交

D.限制性内切酶酶谱分析

E.Northern杂交

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第10题

以下哪种检测技术可进行DNA诊断( )

A.RFLP分析

B.PCR

C.Southern杂交

D.限制性内切酶酶谱分析

E.Northern杂交

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