重叠基因的同一段DNA片段能够以两种或两种以上的方式阅读，可编码两种或两种以上的______。

你纯化出经BamHI消化重组质粒DNA所得的两个DNA片段，其中一个长为400bp，另一个长900bp，你想要如图16-3-20(1)所示将它们连接起来产生一个杂合基因，如果你的推测是正确的话，就会得到令人惊奇的新物质。

你在DNA连接酶存在情况下将两种片段混合在一起并且进行孵育，30分钟后和8小时后，你取一些样品进行琼脂糖凝胶电泳分析，你惊讶地发现连接得到了一系列复杂的DNA片段而不是所需的1.3kb小片段，并且发现孵育时间越长，小片段浓度越低而大片段浓度增加，如果你用BamHI切割连接后的重组体，你会重新获得开始的两片段(图16-3-20(2)A)。

令人吃惊的是，你将从琼脂糖凝胶中纯化得到的1.3kb片段用BamHI消化，检查它的结构，与预想的一样，可以得到最初的两片段(图16-3-20(2)B)。这就可以确定这是你所需的结构。但是，你用EcoRl消化另一份样品，你希望通过消化得到300bp的片段和700bp的片段，但你跑的电泳是一系列DNA片段(图16-3-20(2)B)。

由酵母交配型基因座产生的关键调控蛋白之一是一个抑制蛋白，称做α₂。在可交配型的单倍体细胞中，α₂对于关闭一系列涉及到交配型特异性的基因是必需的。在α₂二倍体细胞中，α₂抑制物同α₁基因产物协同作用，关闭了除α特异性基因外的一系列单倍体特异性的基因。两类有区别又相互关联的保守DNA序列在这两套控制基因的上游被发现，一个在单倍体特异性基因前，另一个在α特异性基因前。根据这些上游序列的相关性，很有可能α₂与两者都结合。然而，它的结合特性在它能识别单倍体特异性基因前必须通过α₁蛋白以某种方式进行修饰。至此，这种修饰作用的本质是什么？α₁是能催化α₂的共价修饰，还是能与α₂结合而修饰α₂蛋白？

为了认清这些问题，要做三个实验。首先，在单独作用和共同作用两种方式下，测定α₁和α₂与两种上游调控DNA位点的结合(图13-3-50所示)。α₁单独不能同含有任何调控位点的DNA片段结合。然而α₂虽能与α专一性片段结合，但是不能同单倍体专一性片段结合。α₁和α₂的混合物同两者都能结合。

在第二个实验中，大量的含α专一性序列的未标记DNA加入到α₁和α₂蛋白的混合物中。在这样的条件下，单倍体专一性片段仍被束缚。同样，如果加入过量的含有单倍体专一性片段的未标记DNA到混合物中，α专一性片段仍然被束缚。

在第三个实验中，改变不同的α₁和α₂的比例，当α₂过量时，同单倍体专一性片段的结合减弱，而当α₁过量时，同α专一性片段的结合减弱。

A.一般情况下，用同一种限制酶切割质粒和含有目的基因的片段，但有时可用两种限制酶分别切割质粒和目的基因，这样可避免质粒和质粒之间、目的基因和目的基因之间的连接

B.标记基因的作用：筛选、检测目的基因是否导入受体细胞，常见的标记基因有抗生素抗性基因、发光基因（表达产物为带颜色的物质）等

C.在基因表达载体中，启动子（DNA片段）转录出起始密码子（RNA）；终止子（DNA片段）转录出终止密码子（RNA）

D.用CaCl2处理大肠杆菌使之转变为感受态，细胞透性加大有利于DNA透过大肠杆菌

A.过渡效果是实现视频片段间转换的转场效果的方法。

B.过渡是指两个视频道上的视频片段有重叠时，从一个片段平滑、连续地变化到另一段的过程。

C.两视频片段间只能有一种过渡效果。

D.视频过渡也是一个视频片段。

片段重新连接起来，得到如图Q25.1所示的结果。

图025.1杂合基因的结构

于是将这两种片段混合起来，并在连接酶的存在下进行温育，分别在30min和8h取样进行凝胶电泳分析。令人惊讶的是，连接产物并非是理想中的1.3kb的重组分子，而是一种复杂的片段模式[图Q25.2(a)]。同时发现随着温育时间的延长，较小片段的浓度逐渐降低，大片段的浓度逐渐增加。如果用BamH Ⅰ来切割连接后的混合物，则起始的片段可以重新产生[图Q25.2(a)]。

从凝胶中分离纯化出1.3kb的片段，并取出一部分用BamH Ⅰ进行切割，以检查它的结构。正如预料的一样，出现了两个原始的带[图Q25.2(b)]。但是用EcoR Ⅰ切割另一部分样品，希望能够产生两个300bp和一个长度为700bp的核苷酸片段，然而，凝胶电泳的结果，令人惊奇[图Q25.2(b)]。

图Q25.2纯化DNA片段连接后电泳检测

A.限制酶水解相邻核苷酸间的化学键切断DNA

B.NA连接酶可将末端碱基互补的两个DNA片段连接起来

C.NA聚合酶能够从引物末端延伸DNA或RNA

D.逆转录酶以一条RNA为模板合成互补的DNA

A.限制酶切开相邻核苷酸间的化学键剪断DNA

B.DNA连接酶可将末端碱基互补的两个DNA片段连接

C.DNA聚合酶能够从引物末端延伸DNA或RNA

D.逆转录酶以一条RNA为模板合成互补的DNA单链

A.指基因在染色体上的相对位置与遗传距离

B.指DNA标志在染色体上的相对位置与遗传距离

C.通过该图谱可分清各基因或DNA片段之间的相对距离

D.通过该图谱可分清各基因或DNA片段之间的方向