碱裂解法提取质粒DNA的原理，分析影响试验结果的各种可能因素。

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发布时间：2022-07-19

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第1题

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第2题

说朗变性定位法和限制性内切核酸酶定位法研究质粒复制起点的原理。

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第3题

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质粒pHUBI DNA是双链环状，长5.7kb(5.7×10³个碱基对)。这个质粒带有某基因，它的蛋白质产物使宿主细菌对四环素具有抗性(Tet-r)。该DNA对下列每种限制酶具有一个识别位点：EcoRI、HpaI、BamHI、PstI、SalI、BglII。在BarnHI和SalI位点处克隆会破环四环素抗性；在其他酶的位点处克隆则保留四环素抗性。用各种限制酶以及酶混合物消化可得到如表16-2-11所列的DNA片段。试在pHUBIDNA图上标出所有这些酶的切点。将DNA图画成环形，在圆周上以5.7kb总长标出刻度。

表16-2-11

酶混合物

片段长度(kb)

EcoRI

EcoRI，BamHI

EcoRI，HpaI

EcoRI，SalI

EcoRI，BglII

EcoRI，PstI

PstI，BglII

BglII，HpaI

5.7